Министерство здравоохранения Российской Федерации
Государственный стандарт качества лекарственного средства
Опубликовано 19.03.2014

Анальгин  - фармакопейная статья

Анальгин - фармакопейная статья

Категория: Фармацевтические субстанции

Анальгин ФС 42-
Взамен ст. ГФ XII, часть 1,ФС 42-0215-07

[(1,5-Диметил-3-оксо-2-фенил-2,3-дигидро-1H-пиразол-4-ил)(метил)амино]-метансульфонат натрия, моногидрат

Анальгин Формула

C13H16N3NaO4S · H2O М.м. 351,36
М.м. 333,34 (безводный)

Cодержит не менее 99,0 % C13H16N3NaO4S в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый или белый с едва заметным желтоватым оттенком кристаллический порошок без запаха.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра анальгина (Приложение 1).

Ультрафиолетовый спектр поглощения 0,002 % раствора субстанции в
0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области от 245 до 280 нм должен иметь максимум при 258 нм.

0,05 г субстанции растворяют в 1 мл водорода пероксида. Раствор окрашивается в слегка голубой цвет, который быстро исчезает и через несколько минут раствор становится красным.

0,1 г субстанции смачивают 0,1 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 96 % и 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведенной 8,3 %. После растворения субстанции прибавляют 5 мл 0,1 М раствора калия йодата; раствор окрашива-ется в малиновый цвет; при дальнейшем прибавлении реактива окраска усиливается и выделяется бурый осадок.

Субстанция дает характерную реакцию Б на натрий.

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.

Цветность раствора. 6,25 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до метки и перемешивают (испытуемый раствор). Не более чем через 10 мин проводят испытание одним из методов.

А. Окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски эталона GY6.

Б. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 400 нм относительно воды, должна быть не более 0,1.

рН. От 6,0 до 7,5 (10 % раствор).

Посторонние примеси. Определение проводят одним из методов.

Метод ТСХ.

Испытуемый раствор. 1 г субстанции помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл безводного хлороформа, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют через бумажный фильтр, смоченный безводным хлороформом, отбрасывая первые порции фильтрата.

Раствор сравнения А. 0,01 г 4-аминоантипирина растворяют в 50 мл безводного хлороформа.

Раствор сравнения Б. 10 мл раствора сравнения А разбавляют безводным хлороформом до 25 мл.

Раствор 4-метиламиноантипирина. 0,035 г субстанции растворяют в 5 мл предварительно охлажденного до 10 ºС 0,01 М раствора хлористоводо-родной кислоты и прибавляют по каплям при перемешивании 0,1 М раствор йода до появления желтой окраски, не исчезающей в течение 1 мин, следя за тем, чтобы температура раствора не превышала 10 ºС. К полученному раствору прибавляют по каплям 0,1 М раствор натрия гидроксида до рН 8 и дважды экстрагируют 4-метиламиноантипирин хлороформом порциями по
5 мл. Объединенные хлороформные извлечения сушат в течение 30 мин над 0,5 г натрия сульфата безводного. 1 мл полученного раствора разбавляют безводным хлороформом до 25 мл.

На линию старта пластинки со слоем силикагеля 60 F254 наносят 10 мкл (эквивалент 400 мкг анальгина) испытуемого раствора, 10 мкл (2 мкг) раствора сравнения А, 10 мкл (0,8 мкг) раствора сравнения Б и в одну точку 5 мкл (0,4 мкг) раствора сравнения Б и 5 мкл (около 0,4 мкг) раствора
4-метиламиноантипирина. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру со смесью хлороформ — метанол (4:1) и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы пройдет 3/4 длины пластинки, ее вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в УФ свете при 254 нм.

Пятно посторонней примеси на хроматограмме испытуемого раствора, находящееся на одном уровне с пятном 4-метиламиноантипирина на хроматограмме из общей точки нанесения, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %); пятно любой другой посторонней примеси не должно превышать пятно на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %). Суммарное содержание примесей не должно превышать 0,5 %. Пятно вблизи линии старта (анальгин) в расчет не принимают.

Результаты испытания считаются достоверными, если на хроматограмме из общей точки нанесения четко видны два полностью разделенных пятна.

Метод ВЭЖХ.

Буферный раствор с рН 7,0. 6,0 г натрия фосфата однозамещенного растворяют в 1000 мл воды, прибавляют 1 мл триэтиламина и доводят рН раствора 10 % раствором натрия гидроксида до значения 7,0.

Испытуемый раствор. 0,050 г субстанции растворяют в 10 мл метанола. Раствор анализируют тотчас же.

0,05 % раствор 4-аминоантипирина. 0,010 г 4-аминоантипирина растворяют в 20 мл метанола.

Раствор сравнения. 1 мл 0,05 % раствора 4-аминоантипирина разводят метанолом до 20 мл.

Раствор для проверки пригодности системы. 0,02 г субстанции растворяют в 10 мл метанола и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин, охлаждают и разводят метанолом до 20 мл. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл 0,05 % раствора 4-аминоантипирина и перемешивают.

Условия хроматографирования

Колонка — 25 × 0,46 см с октадецилсилил силикагелем (C18), 5 мкм;
Подвижная фаза (ПФ) — буферный раствор с рН 7,0 — метанол (72:28);
Скорость потока — 1,0 мл/мин;
Детектор — спектрофотометрический, 254 нм;
Объем пробы -10 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности системы. На хроматограмме должно наблюдаться 3 пика с относительными временами удерживания 1,0 (анальгин), около 1,4 (4-аминоантипирин) и около 2,0
(4-метиламиноантипирин). Разрешение (R) между пиками анальгина и 4-ами-ноантипирина должно быть не менее 2,2; между пиками 4-аминоантипирина и 4-метиламиноантипирина – не менее 3,0.

Последовательно хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор. Время регистрации хроматограммы испытуемого раствора должно не менее чем в 1,5 раза превышать время удерживания пика 4-метиламино-антипирина.

На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика 4-метиламино-антипирина должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %), площадь пика любой другой примеси должна быть не более 40 % от площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %), суммарная площадь пиков примесей должна быть не более площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %). Не учитывают пики, площадь которых составляет 5 % и менее от площади пика на хроматограмме раствора сравнения.

Потеря в массе при высушивании. Около 0,5 г (точная навеска) субстанции сушат при температуре от 100 до 105 ºС до постоянной массы. Потеря в массе должна быть не менее 4,7 % и не более 5,5 %.

Хлориды. 0,5 г субстанции помещают в коническую колбу вместимо-стью 50 мл, растворяют в 10 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведенной 16 % и осторожно кипятят в течение 5 мин. После охлаждения раствор переносят в пробирку, содержащую 0,15 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, доводят объем раствора водой до 10 мл и через 1 мин просматривают в проходящем свете.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Не должно быть опалесценции, превышающей опалесценцию кон-трольного опыта.

Сульфаты. 0,1 г субстанции растворяют в 10 мл воды и тотчас же проводят испытание (не более 0,1 % в субстанции).

Тяжелые металлы. Сульфатная зола из 1 г субстанции должна выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,001 % в субстанции).

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,14 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции (концентрация 10 мг/мл), а затем разводят его не менее чем в 4 раза.

Испытание проводят для субстанции, предназначенной для приготовления инъекционных лекарственных форм.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Около 0,15 г (точная навеска) субстанции помещают в сухую колбу, прибавляют 20 мл спирта 96 %, 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и тотчас титруют 0,1 М раствором йода при перемешивании до появления желтой окраски, не исчезающей в течение 30 с.

1 мл 0,1 М раствора йода соответствует 16,67 мг C13H16N3NaO4S.

Хранение. В защищенном от света месте.