Министерство здравоохранения Российской Федерации
Государственный стандарт качества лекарственного средства
Опубликовано 19.03.2014

Кора калины  - фармакопейная статья

Кора калины - фармакопейная статья

Категория: Лекарственное растительное сырье

Кора калины
ФС 42-
Сortex viburni Взамен ФС 4 ГФ СССР XI издания

Собранную весной в фазу бутонизации кору стволов и ветвей дикорастущего кустарника калины обыкновенной Viburnum opulus L. и калины Гордовины – Viburnum lantana, сем. жимолостных Caprifoliaceae.

Подлинность

Внешние признаки. Цельная кора. Трубчатые, желобоватые или плоские кусочки коры различной длины, толщиной около 2 мм. Наружная поверхность коры морщинистая, буровато-серая или зеленовато-серая с мелкими чечевичками. Внутренняя поверхность гладкая, светло- или буровато-желтая с мелкими красноватыми пятнышками или полосками (кора калины обыкновенной). На внутренней поверхности коры калины Гордовины отсутствуют мелкие красноватые пятнышки. Излом коры мелкозернистый. Запаха нет или запах слабый неспецифический. Вкус водного извлечения горьковатый, вяжущий.

Измельченная кора. Кусочки коры различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Цвет буровато-серый, зеленовато-серый, буровато-желтый. Запах слабый. Вкус водного извлечения горьковатый вяжущий.

Кусочки коры, снаружи морщинистые буровато-серого или зеленовато-серого цвета, с мелкими чечевичками; с внутренней стороны кусочки гладкие, светло- или буровато-желтого цвета с мелкими красноватыми пятнышками или полосками (кора калины обыкновенной) или без красноватых пятнышек (кора калины Гордовины). Излом — мелкозернистый.

Порошок. Анализ проводят в соответствии с указаниями «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» по методике приготовления микропрепаратов порошка кор, (в соответствии с требованиями действующей Государственной Фармакопеи).

В приготовленных микропрепаратах порошка должны быть видны более мелкие частицы в сравнении с давленными микропрепаратами:

—  обрывки паренхимы с клетками, содержащими друзы и капельки смолы (обильно — в коре калины Гордовине, редко — в коре калины обыкновенной);

— группы каменистых клеток и отдельные каменистые клетки, очертания которых в коре калины Гордовины плохо различимы из-за окружающей паренхимы обильно содержащей капельки смолы; одиночные друзы оксалата кальция.

Запаха нет или запах слабый неспецифический. Вкус водного извлечения горьковатый, вяжущий.

Микроскопические признаки. Цельная кора. На поперечном срезе должен быть виден бурый многорядный пробковый слой (рис. 1.1) (более 100 рядов), клетки которого неправильной формы (округлой, прямоугольной, квадратной в очертании) с прямыми и слабо извилистыми стенками. Под пробкой (рис. 2.1) располагается 3-4 ряда пластинчатой колленхимы (рис. 1.2, 2.2.). На границе первичной и вторичной коры одиночно или небольшими группами (по 2-4) расположены лубяные волокна (рис. 2.5). Стенки лубяных волокон толстые (рис. 1.6, 2.5), слоистые, неодревесневшие, пронизаны тончайшими порами. Во вторичной коре редко расположены одно-трехрядные сердцевинные лучи; встречаются крупные каменистые клетки желтого цвета с сильно утолщенными слоистыми стенками (длиной 8-71 мкм, шириной 8-42 мкм — в калине Гордовине; длиной 102-510 мкм, шириной 112-170 мкм в калине обыкновенной), пронизанными многочисленными порами. Каменистые клетки (рис. 1.3, 2.3) представлены небольшими (2-6) тангентально вытянутыми группами, реже одиночно. В паренхиме коры, особенно первичной, видны многочисленные друзы оксалата кальция (рис. 1.4, 2.4) (диаметром 4-21 мкм в калине Гордовине; 4-67 мкм в калине обыкновенной) и капельки смолы (рис. 1.5, 2.6) (многочисленные — в калине Гордовине, редко — в калине обыкновенной).

Измельченная кора. В давленных микропрепаратах должны быть видны мелкие и крупные частицы (обычно в продольном сечении):

одиночные друзы оксалата кальция (рис. 4.3, 5.3).

Порошок. В приготовленных микропрепаратах порошка должны быть видны более мелкие частицы в сравнении с давленными микропрепаратами:

—  обрывки паренхимы с клетками, содержащими друзы (рис. 4.2, 6.2) и капельки смолы (рис. 4.3) (обильно — в коре калины Гордовине, редко — в коре калины обыкновенной);

— группы каменистых клеток (рис. 4.1, 6.1) и отдельные каменистые клетки, очертания которых в коре калины Гордовины плохо различимы из-за окружающей паренхимы, обильно содержащей капельки смолы;

Кора калины Гордовины. Поперечный срез

Кора калины Гордовины. Поперечный срез

Рисунок – 1. Кора калины Гордовины. Поперечный срез: 1 – пробка;
2 – колленхима; 3 – группы каменистых клеток; 4 – друзы; 5 – капли смолы. (Ув.х100).

Кора калины Гордовины. Поперечный срез

Кора калины Гордовины. Поперечный срез

Рисунок – 2. Кора калины Гордовины. Поперечный срез: 1.пробка;
2.колленхима; 3.группы каменистых клеток; 4.друзы;
5.лубяные волокна; 6.капли смолы. (Слева: Ув.х100; справа: Ув.х250).

Кора калины Гордовины. Давленный препарат

Кора калины Гордовины. Давленный препарат

Рисунок – 3. Кора калины Гордовины. Давленный препарат:
1 – друзы; 2 – капли смолы. (Ув.х125).

Кора калины Гордовины

Кора калины Гордовины

Рисунок – 4 Кора калины Гордовины. Слева: давленный препарат; справа: порошок.
1 – группы каменистых клеток; 2 – друзы; 3 – капли смолы. (Ув.х125).

Кора калины Гордовины. Давленный препарат

Кора калины Гордовины. Давленный препарат

Рисунок – 5. Кора калины Гордовины. Давленный препарат: 1 – пробка;
2 –группа каменистых клеток; 3 – друзы; 4 – капли смолы. (Ув.х125).

Кора калины Гордовины. Порошок

Кора калины Гордовины. Порошок

Рисунок – 6 Кора калины Гордовины. Порошок:
1 – группа каменистых клеток; 2 – друзы. (Ув.х250).

Кора калины обыкновенной

Кора калины обыкновенной

Рисунок – 7. Кора калины обыкновенной.
Слева: давленный препарат (Ув.х125). Справа: порошок (Ув.х100).
1 – группы каменистых клеток; 2 – друзы; 3 – лубяное волокно; 4 – капли смолы.

Определение основных групп биологически активных веществ. При смачивании внутренней поверхности коры калины обыкновенной и калины Гордовины каплей раствора железоаммониевых квасцов наблюдается черно – зеленое окрашивание (дубильные вещества).

Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм; 0,5 г измельченного сырья заливают 10 мл 95 % этилового спирта и настаивают 20 мин при комнатной температуре. Полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр и упаривают под вакуумом до объема около 1-1,5 мл; 0,1 мл полученного извлечения наносят полосой шириной 0,5 см на хроматографическую пластинку и хроматографируют восходящим способом в системе растворителей хлороформ-метиловый спирт (9:1). Затем хроматограмму высушивают в вытяжном шкафу, опрыскивают реактивом Шталя и выдерживают в сушильном шкафу при темпе­ратуре 110 °С в течение 5-8 мин; при этом на хроматограмме должны проявиться 3-5 зон абсорбции сине-зеленого цвета (иридоиды) и 2-3 зон абсорбции красно-малинового цвета (дубильные вещества).

Примечание

Приготовление реактива Шталя. В колбу вместимостью

100 мл помещают 5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты, 50 мл 95 % этилового спирта и 1 г п-диметил-аминобензальдегида. После полного растворения доводят объем раствора 95 % этиловым спиртом до метки.

Числовые показатели. Цельная кора. Дубильных веществ не менее
4 %; дубильных веществ конденсированного ряда не менее 1,9 %; экстрактивных веществ, извлекаемых 50 % этиловым спиртом не менее
18 %; влажность не более 14 %; золы общей не более 10 %; золы не растворимой в хлористоводородной кислоте не более 1 %; кусочков коры потемневшей с внутренней стороны, не более 5 %; кусочков коры с остатками древесины и веточек не более 2 %; органической примеси не более 0,5 %.

Измельченная кора. Дубильных веществ не менее 4 %; дубильных веществ конденсированного ряда не менее 1,9 %; экстрактивных веществ, извлекаемых 50 % этиловым спиртом не менее 18 %; влажность не более
14 %; золы общей не более 10 %; золы не растворимой в хлористоводородной кислоте не более 1 %; кусочков коры потемневшей с внутренней стороны, не более 5 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм, не более 8 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 10 %; органической примеси не более 1,5 %; минеральной примеси не более 0,5 %.

Порошок. Дубильных веществ не менее 4 %; дубильных веществ конденсированного ряда не менее 1,9 %; экстрактивных веществ, извлекаемых 50 % этиловым спиртом не менее 18 %; влажность не более
14 %; золы общей не более 10 %; золы не растворимой в хлористоводородной кислоте не более 1 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм, не более 5 %.

Количественное определение. Гидролизуемые дубильные вещества определяют по методу 1 ОФС «Определение содержания  дубильных веществ в лекарственном растительном сырье».

Дубильные вещества конденсированного ряда определяют методом спектрофотометрии. Аналитическую пробу сырья, измельченного до размера частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 3 мм. Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, добавляют 100 мл воды и нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 мин. Охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 200 мл. К оставшемуся в колбе сырью добавляют 50 мл воды и помещают на водяную баню на 15 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в ту же колбу вместимостью 200 мл. Промывают вату с сырьем 2 раза по 20 мл воды и доводят объем извлечения водой до метки, перемешивают. Фильтруют через бумажный фильтр (раствор А).

Около 0,02 г (точная навеска) катехина гидрата растворяют в 50 мл горячей воды в мерной колбе вместимостью 100 мл. Полученный раствор доводят водой до метки, перемешивают (раствор стандарта).

В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 10 мл раствора А, раствора стандарта, воды.

В каждую из трех колб добавляют по 5 мл фосфатного буфера, 12,5 мл железо-тартратного реактива, соответственно доводят водой до меток и пе­ремешивают.

Измеряют оптическую плотность анализируемого и стандартного раствора относительно раствора третей колбы в кювете с толщиной слоя
10 мм при длине волны 545 нм.

Содержание дубильных веществ в процентах (X) рассчитывают по формуле:

Содержание дубильных веществ в процентах

D – оптическая плотность испытуемого раствора;

D0 – оптическая плотность раствора СО катехина в г;

m, – навеска рабочего стандартного образца катехина;

а – навеска сырья в г;

W – влажность в %.

Примечания:

  1. Приготовление буферного раствора с рН 8,2. В мерную колбу вместимостью 200 мл отмеривают 50 мл раствора буферной кислоты 0,2 моль/л, прибавляют 5,90 мл раствора натрия гидрооксида 0,2 моль/л, перемешивают, доводят объем раствора водой до метки и измеряют рН раствора потенциометрически.
  2. Приготовление железо-тартратный реактива. 0,46 г железа (II) сульфата и 1,25 г сеньетовой соли (калия — натрия тартрата 4 — водного) растворяют в воде в мерной колбе емкостью 250 мл. Раствор годен 48 часов при хранении в холодильнике.

Тяжелые металлы. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радиоактивность. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье».

Остаточные количества пестицидов. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Определение проводят согласно ОФС «Микробиологическая чистота».

Упаковка, маркировка и транспортирование. Осуществляется с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья».

Хранение. Хранение ЛРС осуществляется с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».